2023年11月4日-5日在日本福冈国际会议场举办的第62届日本临床细胞学学会（JSCC）秋季会中，日本红十字会爱知医疗中心名古屋第一医院的郡司昌治先生使用安必平探针撰写的病例海报在第二天的第四区域共10个演讲中荣获唯一一项优秀演讲议题。
日本临床细胞学学会（JSCC）成立于1961年，是一个促进临床细胞学和细胞病理学科学研究以及研究结果在临床实践中应用的学术学会。JSCC涵盖细胞学（尤其是肿瘤学）诊断科学的各个领域，包括妇科、外科、内科、病理学和牙科。如今JSCC的科学活动已经超出了细胞形态学诊断，包括对癌症遗传突变和癌症基因非典型表达的分子细胞学研究、自动细胞诊断，以及引入支持远程医疗的新技术，如远程细胞影学。JSCC活动的一个重要目标是培养和认证细胞学专业人员，JSCC的多项细胞学人员的专业认证使日本的细胞学诊断成为世界上最先进的诊断之一。
本次荣获第62届JSCC优秀演讲议题的病例海报主题为“FISH在造血系统肿瘤中骨髓细胞诊断中的应用”，海报中展示了4个病例，说明了FISH技术在鉴别造血系统肿瘤中枢神经系统感染等并发症的重要应用。
引言
即使在CT和MRI等影像诊断发展的今天，骨髓细胞学在细菌性脑膜炎和病毒性脑膜炎等中枢神经系统感染症和白血病、恶性肿瘤等诊断、治疗仍是不可缺少的检查。由于骨髓液的渗透压低，蛋白量也少，即使冷藏保存也不能完全防止细胞的快速变性，所以需要在采集后1小时内制作标本。骨髓细胞学检测是对诊断发生中枢神经浸润白血病有用的检查，但也存在与病毒性脑膜炎鉴别困难的病例。另外，还会发生细胞蜡块制作困难和免疫组化等追加其他检测困难的情况。该研究选取了4例脑脊液细胞难以诊断且染色体核型异常的白血病病例，将从未染色标本、帕帕尼科拉乌氏染色标本、吉姆萨染色标本进行FISH检测，并进行诊断。本文报告了应用FISH检测有效鉴别中枢神经系统感染和白血病病例。
病例一
44岁男性 APL M3型；
核型G显带分析：46，XX，t(15;17)(q22;q12)；
X年3月以伴有DIC的血细胞异常，诊断为APL M3型；
X年4月 JALSGAPL212治疗开始，随后 molecular CR；
X+1年7月主诉头痛，发生骨髓液APL中枢神经浸润复发；
X+1年10月通过基因检查确认molecular CR；
X+1年11月发生骨髓液APL中枢神经浸润复发；
X+2年1月 FISH(PML:RARA)检查确认骨髓液中肿瘤消失；
X+2年1月实施骨髓移植(UR-PBSCT)；
X+2年1月 Day23 因骨髓细胞数高，怀疑中枢神经浸润，进行骨髓液检查。细胞观察结果显示淋巴细胞和单核细胞等单核细胞和中性粒细胞混合存在。与初次CNS浸润不同，细胞质呈淡色性，出现空泡形成，没有发生N/C比增大，疑似病毒感染。发现细胞核形态不典型，难以与母细胞鉴别，难以诊断。PML::RARA的FISH检测阴性，细胞学报告阴性。
病例二
4岁女性 ALL TCF:: SPI1阳性；
核型G显带分析：46,XX,der (1)(qter---q25::34--qter)，-9,del (9)(p?)，+19；
X年1月发热、淋巴结肿胀、肝脾肿、血细胞异常诊断为ALL；
X+1年8月实施骨髓移植(UR-PBSCT)；
X+2年9月发烧、头痛、后颈痛主诉来医院。根据CT、MRI图像，怀疑脑膜炎。由于不能否定中枢神经浸润，因此实施了骨髓细胞学检查。细胞表现为中性粒细胞、淋巴细胞、单细胞等多种细胞表现，怀疑脑膜炎。不规则形态细胞混合出现，难以与母细胞进行鉴别，难以诊断。对19号染色体进行FISH检测，确认阴性，细胞检查报告阴性。
病例三
0岁女性 AML MNX1::ETV6阳性；
核型G显带分析：50，XX,+6，del (7)(q?)，del(12)(p?)，+13,+13，+19；
X年7月发热、左面神经麻痹、血细胞异常诊断为AML；
X年8月首次进行骨髓细胞检查，诊断为中枢神经浸润；
X年8月髓注治疗14天后，进行骨髓细胞检查。检测细胞数量较少，细胞所见出现组织细胞、淋巴细胞和单细胞。细胞质发现弱嗜碱性和轻度核形态异常，怀疑为母细胞。ETV6:: AML1 FISH检测确认阳性，细胞检查报告阳性。
病例四
66岁男性 AML（M4） CBFβ:: MYH11阳性；
核型G显带分析：46,XY,t(16;16)(p13.1;q22)/46XY,idem,t(12;13)(q24.1;q12)；
X年3月发热、扁桃体肿大、淋巴结肿胀、血细胞异常，诊断为AML；
X+1年1月实施固体治疗(MIT+AraC)后，3月实施骨髓移植(UR-BMT)；
X+1年10月每周进展性发生下肢肌力下降，进行骨髓细胞学检查，诊断为中枢神经浸润，联合脊髓放疗；
X+1年12月骨髓细胞检查，确定治疗效果。细胞观察，在发现红细胞的背景下，细胞数非常少。具有弱嗜碱性细胞质和轻度核形态异常的细胞少见，不能诊断为母细胞。进行CBFB基因重排FISH检测阳性，细胞学报告阳性。
以下为使用安必平FISH探针示意图：
总结
在造血系统肿瘤化疗中最需要注意的并发症是感染。当骨髓细胞数增加时需要鉴别中枢神经浸润和脑膜炎。但即使在脑膜炎中，也存在需要与母细胞鉴别的核形态异型的细胞，在难以进行细胞诊断时可通过应用FISH检测进行准确的诊断。
此外，造血系统肿瘤为了治疗或预防中枢神经系统浸润而进行抗癌药物髓注射。在治疗中枢神经浸润时，骨髓液中有无母细胞对今后的治疗方针很重要。但是，治疗过程中骨髓细胞数少，出现的细胞难以与肿瘤细胞相鉴别，FISH检测可作为鉴别的有用手段。
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